Blog

I. Pozadina i cilj

Mikroalge, kao tipična klasa mikrobnih uzoraka, igraju važnu ulogu u studijama ekstrakcije nukleinskih kiselina i proteina. Međutim, zbog guste strukture ćelijskih zidova i visoke mehaničke čvrstoće, konvencionalne metode razbijanja često ne uspijevaju postići potpunu lizu ćelija, što direktno utiče na prinos i koncentraciju nizvodne ekstrakcije DNK, RNK i proteina.

U ovom eksperimentu, uzorak se sastojao od tečne suspenzije mikroalgi. Efikasno razbijanje ćelija bilo je potrebno pod uslovima niske temperature kako bi se spriječila degradacija RNK i denaturacija proteina. Tradicionalno ultrazvučno razbijanje pokazalo je ograničenu efikasnost čak i nakon produžene obrade i bilo je povezano sa brzim porastom temperature, niskom efikasnošću i lošom ponovljivošću.

Nakon poređenja različitih metoda pripreme uzoraka, odabran je Welso potpuno automatski mlin za tkivo velike brzine. Kombinujući visokofrekventne mehaničke oscilacije sa kriogeno kompatibilnim radom, sistem omogućava efikasno i stabilno razbijanje krutih ćelijskih zidova mikroalgi, pružajući idealno rješenje za prethodnu obradu za visokokvalitetnu ekstrakciju nukleinskih kiselina i proteina.

II. Instrument

Welso potpuno automatski mlin za tkivo velike brzine

Ovaj instrument ima visokofrekventne oscilacije, mogućnost serijske obrade i odličnu kompatibilnost s niskim temperaturama. Pogodan je za brzu i ujednačenu homogenizaciju mikroorganizama, biljnih tkiva i drugih uzoraka visoke žilavosti.

III. Materijali i konfiguracija

2 mL × metalni adapter sa 24 pozicije × 1 set

2 mL epruvete za mljevenje

Cirkonijumske kuglice za mljevenje (kombinacija više veličina):

0,1 mm

0,5 mm

1 mm

2 mm

IV. Eksperimentalni postupak

1. Prethodno hlađenje adaptera

Stavite metalni adapter u zamrzivač na -80 °C na 5 minuta prije upotrebe.

Za česte eksperimente, adapter se može direktno pohraniti u zamrzivač na -20 °C nakon upotrebe kako bi se olakšala sljedeća operacija.

2. Priprema uzorka

Prebacite odgovarajuću količinu suspenzije mikroalgi u epruvetu za mljevenje od 2 mL. Dodajte odgovarajuću kombinaciju cirkonijumskih kuglica različitih veličina prema karakteristikama uzorka, a zatim čvrsto zatvorite poklopac epruvete.

3. Ubacivanje uzorka

Instalirajte prethodno ohlađeni metalni adapter na osovinu brusilice, pazeći da je baza adaptera potpuno spojena s utorom pogonske osovine.

Simetrično i ravnomjerno umetnite epruvete za mljevenje u adapter kako biste održali pravilnu ravnotežu.

4. Fiksiranje adaptera

Pokrijte adapter tlačnom kapicom i zategnite maticu za fiksiranje, pazeći da adapter ostane u horizontalnom položaju.

5. Podešavanje parametara i mljevenje

Frekvencija: 70 Hz

Vrijeme mljevenja: 60 s

Interval: 20 s

Ciklusi: 4

Parametri se mogu podesiti prema vrsti mikroalgi, volumenu uzorka i eksperimentalnim zahtjevima.

Nakon što se postavke potvrde, pokrenite program mljevenja.

6. Prikupljanje uzoraka

Nakon završetka, otvorite instrument i izvadite epruvete za mljevenje. Uzorci su tada spremni za direktnu ekstrakciju nukleinske kiseline ili proteina.

V. Napomene

Različite vrste mikroalgi razlikuju se u sastavu ćelijskih zidova i mehaničkoj čvrstoći. Preporučuje se optimizacija kombinacija veličine kuglica i radnih parametara kako bi se postigla optimalna efikasnost razbijanja.

Cijevi za mljevenje moraju se simetrično puniti kako bi se osigurala pravilna ravnoteža i spriječilo neravnomjerno opterećenje, što može utjecati na performanse mljevenja i stabilnost instrumenta.

Ako je odabir parametara neodređen, korisnici se mogu obratiti Welso tehničkoj podršci ili prodajnim predstavnicima za stručno vodstvo.

VI. Evaluacija performansi

Mikroskopsko posmatranje je pokazalo da su nakon 240 sekundi obrade sa Welso potpuno automatskim mlinom za tkivo velike brzine, strukture ćelija mikroalgi bile temeljno poremećene, sa ćelijskim zidovima gotovo potpuno liziranim i značajno poboljšanom homogenošću uzorka.

U poređenju sa tradicionalnim metodama ultrazvučnog poremećenja, ovaj pristup pokazuje:

✔ Veću efikasnost poremećenja

✔ Značajno smanjeno vrijeme obrade

✔ Poboljšanu reproducibilnost u uslovima niske temperature

✔ Superiorniju pogodnost za šaržnu obradu uzoraka

Ovo rješenje efikasno prevazilazi tehničke izazove „teškog poremećenja ćelijskih zidova i brzog porasta temperature“ u obradi mikroalgi. Pruža pouzdanu metodu predtretmana za visokokvalitetnu ekstrakciju nukleinskih kiselina i proteina, značajno povećavajući efikasnost laboratorije i predstavlja idealan izbor za mikroalge i druge mikrobne uzorke visoke otpornosti.